ANÁLISIS
Cuando se trata de la detección de Lyme y coinfecciones, el principal tipo de prueba es un análisis de sangre que busca anticuerpos contra las bacterias que causan la enfermedad infecciosa. Es lo que se conoce como serología. Si los anticuerpos no se han desarrollado lo suficiente o el sistema inmunitario no es lo bastante fuerte como para desarrollar anticuerpos (sistema inmunitario deprimido), es posible que estas pruebas den negativo a pesar de la infección activa, lo que se denomina «falso negativo». Las pruebas siempre han sido una parte controvertida del proceso de detección y culpables de que muchos enfermos no hayan recibido el tratamiento adecuado debido a los falsos negativos o a la detección incompleta del patógeno y la infección.
Tipos de pruebas
Existen dos tipos básicos de pruebas: indirectas y directas. La diferencia estriba en dónde se centra la atención, en la respuesta inmunitaria o en la infección:
Indirectas: Mide la respuesta inmunitaria a la infección (serologías y ensayos de respuesta de células T).
Directas: Detecta y mide el propio organismo infectado.
PRUEBAS
FISH (Hibridación fluorescente in situ)
La hibridación fluorescente in situ (FISH) es una técnica utilizada en las pruebas genéticas para ayudar a diagnosticar enfermedades causadas por diferencias cromosómicas. Los profesionales sanitarios también pueden utilizar la FISH para detectar cambios genéticos a los que dirigirse para tratar el patógeno. La FISH utiliza proteínas o etiquetas químicas para «pintar» partes de cromosomas o genes que los patólogos buscan para diagnosticar enfermedades. Las etiquetas se ven como luces de colores al microscopio.
Elisa
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas. Este sistema de ensayo puede ser tanto indirecto como directo. Los ELISA directos utilizan un anticuerpo primario conjugado, mientras que los ELISA indirectos incluyen un paso adicional de amplificación. En un ELISA indirecto, un anticuerpo primario no conjugado se une al antígeno y, a continuación, un anticuerpo secundario marcado dirigido contra la especie huésped del anticuerpo primario se une al anticuerpo primario.
Western Blot
El western blot (a veces denominado inmunoblot de proteínas), o western blotting, es una técnica analítica ampliamente utilizada en biología molecular e inmunogenética para detectar proteínas específicas en una muestra de homogeneizado o extracto de tejido. Además de detectar las proteínas, esta técnica también se utiliza para visualizar, distinguir y cuantificar las distintas proteínas de una combinación proteica complicada. Indirecta.
InmunoBlot
El ImmunoBlot, también conocido como Western blot, es un método avanzado para identificar proteínas en muestras biológicas. En el caso de las infecciones, este método suele utilizarse para confirmar la presencia de anticuerpos específicos contra determinadas proteínas o antígenos. En primer lugar, las proteínas se separan por electroforesis según su tamaño y luego se transfieren a un soporte sólido, como una membrana de nitrocelulosa. A continuación, la muestra se aplica al soporte y, si hay anticuerpos específicos, se unen a las proteínas correspondientes. Posteriormente, los anticuerpos unidos se visualizan, a menudo añadiendo un anticuerpo secundario marcado con enzima o fluorescencia y un sustrato apropiado. Los patrones de bandas generados por el inmunoblot pueden proporcionar información sobre la presencia y especificidad de los anticuerpos en la muestra.
EliSpot
EliSpot es una tecnología utilizada para evaluar la respuesta inmunitaria funcional de las células T a diversos antígenos mediante ensayos de manchas inmunitarias ligadas a enzimas. Este sistema de pruebas permite examinar una variedad de infecciones y patógenos, incluidos agentes bien conocidos como Ehrlichia & Anaplasma, Bartonella, Babesia, así como infecciones víricas causadas por el virus de Epstein-Barr (VEB), el virus del herpes simple, el citomegalovirus y otros.
iSpot
La prueba iSpot analiza las reacciones de las células T para proporcionar información sobre el sistema inmunitario celular, crucial para el diagnóstico de infecciones crónicas y oportunistas. Mide las citocinas IFN-γ e IL2, y es relevante para diversas enfermedades infecciosas, como Borrelia, Anaplasma y SARS-CoV-2. Su objetivo es establecer un nuevo estándar de diagnóstico.
TickPlex
El ensayo TickPlex se realiza sobre la base de un ELISA. En comparación con otros ensayos ELISA, esta prueba incluye un nuevo antígeno para Borrelia persisters. Las pruebas con TickPlex Plus detectan anticuerpos contra los patógenos Ehrlichia, Mycoplasma, Bartonella, Rickettsia, Babesia, EBV, Parvovirus y virus Coxsackie utilizando el ELISA más sensible y específico en comparación con todos los métodos de prueba IFT disponibles anteriormente. El TickPlex puede utilizarse en varias fases de la enfermedad.
PCR
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) detecta pequeñas cantidades de material genético de un patógeno (organismo causante de la enfermedad) o células anormales en una muestra de sangre, saliva, mucosidad o tejido. El material genético puede ser ADN, que contiene la información genética necesaria para que una persona y la mayoría de los seres vivos se desarrollen y crezcan.
ddPCR
Un nuevo método de detección directa, el ensayo ddPCR multiplex, mejorará la eficacia y la precisión de las pruebas directas de bartonelosis, babesiosis y borreliosis de Lyme, lo que permitirá a los profesionales sanitarios y a los pacientes tener más confianza en los diagnósticos. En lugar de realizar una única reacción en una muestra de prueba, esta potente tecnología divide la muestra en aproximadamente 20.000 gotas y analiza cada gota para detectar la presencia de ADN. Al reducir el número potencial de inhibidores de la PCR en cada reacción, aumenta enormemente la sensibilidad de la detección directa de patógenos de baja abundancia. Este método de prueba aún no está disponible comercialmente, pero pronto lo estará.
Tabla de pruebas
Relación entre pruebas indirectas y directas:
1.- Si el sistema inmune es débil, las serologías pueden ser falsos negativos, pero un sistema inmune débil puede permitir un aumento en el número de organismos, por lo que las pruebas directas como FISH y PCR pueden ser más sensibles.
2.- Lo contrario también es cierto – PCR y FISH negativos pueden ser seropositivos debido a una alta respuesta inmune.
Dado que ninguna prueba es 100% sensible, lo que se recomienda es un enfoque de panel en el que se realicen pruebas tanto indirectas como directas.
| Prueba | Tipo | Analisis |
| Elisa | Indirecta | Serología y T-cell |
| Western Blot | Indirecta | Serología y T-cell |
| ImmunoBlot | Indirecta | Serología y T-cell |
| EliSpot | Indirecta | Serología y T-cell |
| iSpot | Indirecta | Serología y T-cell |
| TickPlex (Elisa method) | Indirecta | Serología y T-cell |
| FISH | Directa | Detección de infección |
| PCR | Directa | Detección de infección |
| ddPCR | Directa | Detección de infección |
La nueva generación
Los laboratorios trabajan constantemente para actualizar y mejorar los sistemas de pruebas con el fin de poder ofrecer pruebas que sean lo más fiables posible. Los siguientes laboratorios líderes en lyme y coinfección desarrollan y ofrecen pruebas con un mayor grado de precisión y una indicación más fiel a la naturaleza:
| Prueba | Laboratorio | Web |
| ImmunoBlot | IGeneX | https://igenex.com/ |
| FISH | IGeneX | https://igenex.com/ |
| ddPCR | Galaxy | https://www.galaxydx.com/ |
| EliSpot, iSpot, ImmunoBlot, Tickplex, Elisa | Armin Labs | https://arminlabs.com/en/ |
