Test
En ce qui concerne la détection de Lyme et des coïnfections, le principal type de test est une analyse de sang qui recherche des anticorps contre les bactéries responsables de la maladie infectieuse. C’est ce qu’on appelle la sérologie. Si les anticorps ne se sont pas suffisamment développés ou si le système immunitaire n’est pas assez fort pour développer des anticorps (système immunitaire déprimé), il est possible que ces tests soient négatifs malgré une infection active, ce que l’on appelle un « faux négatif ». Les tests ont toujours été un élément controversé du processus de détection et sont responsables du fait que de nombreuses personnes n’ont pas reçu le traitement adéquat en raison de faux négatifs ou d’une détection incomplète de l’agent pathogène et de l’infection.
Types de tests
Il existe deux types de tests de base, indirects ou directs. La différence se situe au niveau de la réponse immunitaire ou de l’infection.
Indirect : Mesure la réponse immunitaire à l’infection (sérologies et tests de réponse des cellules T).
Direct : Détecte et mesure l’organisme infectieux lui-même.
test
FISH (hybridation fluorescente in situ)
L’hybridation in situ par fluorescence (FISH) est une technique utilisée dans les tests génétiques pour aider à diagnostiquer les maladies causées par des différences chromosomiques. Les prestataires de soins de santé peuvent également utiliser la FISH pour détecter des modifications génétiques qu’ils peuvent cibler pour traiter l’agent pathogène. La FISH utilise des protéines ou des étiquettes chimiques pour « peindre » des parties de chromosomes ou de gènes que les pathologistes recherchent pour diagnostiquer des maladies. Les étiquettes ressemblent à des lumières colorées sous un microscope.
Elisa
Test d’immuno-absorption enzymatique. Ce système de test peut être à la fois indirect et direct.
Les tests ELISA directs utilisent un anticorps primaire conjugué, tandis que les tests ELISA indirects comprennent une étape d’amplification supplémentaire. Dans un ELISA indirect, un anticorps primaire non conjugué se lie à l’antigène, puis un anticorps secondaire marqué, dirigé contre l’espèce hôte de l’anticorps primaire, se lie à l’anticorps primaire.
Western Blot
Le western blot (parfois appelé immunoblot de protéines), ou western blotting, est une technique analytique largement utilisée en biologie moléculaire et en immunogénétique pour détecter des protéines spécifiques dans un échantillon d’homogénat ou d’extrait de tissu. Outre la détection des protéines, cette technique est également utilisée pour visualiser, distinguer et quantifier les différentes protéines dans une combinaison complexe de protéines. Indirect.
ImmunoBlot
L’ImmunoBlot, également connu sous le nom de Western blot, est une méthode avancée d’identification des protéines dans les échantillons biologiques. Dans le cas des infections, cette méthode est souvent utilisée pour confirmer la présence d’anticorps spécifiques contre certaines protéines ou antigènes. Les protéines sont d’abord séparées par électrophorèse en fonction de leur taille, puis transférées sur un support solide, tel qu’une membrane de nitrocellulose ( ). L’échantillon est ensuite appliqué sur le support et, si des anticorps spécifiques sont présents, ils se lient aux protéines correspondantes. Les anticorps liés sont ensuite visualisés, souvent par l’ajout d’un anticorps secondaire marqué par une enzyme ou par fluorescence et d’un substrat approprié. Les bandes générées par l’immunoblot peuvent fournir des informations sur la présence et la spécificité des anticorps dans l’échantillon.
EliSpot
EliSpot est une technologie utilisée pour évaluer la réponse immunitaire fonctionnelle des cellules T à divers antigènes par le biais de tests immunitaires liés à des enzymes. Ce système de test permet d’examiner une variété d’infections et d’agents pathogènes, y compris des agents bien connus tels que Ehrlichia & Anaplasma, Bartonella, Babesia, ainsi que des infections virales causées par le virus d’Epstein-Barr (EBV), le virus de l’herpès simplex, le cytomégalovirus, et d’autres.
iSpot
Le test iSpot analyse les réactions des cellules T afin de fournir des informations sur le système immunitaire cellulaire, cruciales pour le diagnostic des infections chroniques et opportunistes. Il mesure les cytokines IFN-γ et IL2 et s’applique à diverses maladies infectieuses, notamment Borrelia, Anaplasma et SARS-CoV-2. Il vise à établir une nouvelle norme de diagnostic.
TickPlex
Le test TickPlex est réalisé sur la base d’un test ELISA. Par rapport aux autres tests ELISA, ce test comprend un nouvel antigène pour les persistances de Borrelia. Le test TickPlex Plus détecte les anticorps contre les pathogènes Ehrlichia, Mycoplasma, Bartonella, Rickettsia, Babesia, EBV, Parvovirus et Coxsackie en utilisant un test ELISA plus sensible et plus spécifique que toutes les méthodes de test IFT précédemment disponibles. Le TickPlex peut être utilisé à différents stades de la maladie.
PCR
La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) détecte de petites quantités de matériel génétique d’un agent pathogène (organisme pathogène) ou de cellules anormales dans un échantillon de sang, de salive, de mucus ou de tissu. Le matériel génétique peut être de l’ADN, qui contient l’information génétique nécessaire au développement et à la croissance d’une personne et de la plupart des autres êtres vivants.
ddPCR
Une nouvelle méthode de détection directe, le test multiplex ddPCR, améliorera l’efficacité et la précision des tests directs pour la bartonellose, la babésiose et la borréliose de Lyme, permettant aux prestataires de soins de santé et aux patients d’être plus confiants dans leurs diagnostics. Au lieu d’effectuer une seule réaction sur un échantillon de test, cette technologie puissante divise l’échantillon en environ 20 000 gouttelettes et analyse chaque gouttelette pour détecter la présence d’ADN. En réduisant le nombre potentiel d’inhibiteurs de la PCR dans chaque réaction, la sensibilité de la détection directe des agents pathogènes à faible abondance est considérablement accrue. Cette méthode de test n’est pas encore disponible dans le commerce, mais le sera bientôt.
Carte de test
Relation entre les tests indirects et les tests directs :
1.- Si le système immunitaire est faible, les sérologies peuvent être faussement négatives, mais un système immunitaire faible peut permettre une augmentation du nombre d’organismes, de sorte que les tests directs tels que la FISH et la PCR peuvent être plus sensibles.
2 – L’inverse est également vrai – une PCR et une FISH négatives peuvent être séropositives en raison d’une réponse immunitaire élevée.
Comme aucun test n’est sensible à 100 %, il est recommandé d’adopter une approche par panel en effectuant des tests indirects et directs.
| Test | Type | Analisis |
| Elisa | Indirect | Sérologie et cellules T |
| Western Blot | Indirect | Sérologie et cellules T |
| ImmunoBlot | Indirect | Sérologie et cellules T |
| EliSpot | Indirect | Sérologie et cellules T |
| iSpot | Indirect | Sérologie et cellules T |
| TickPlex (Elisa method) | Indirect | Sérologie et cellules T |
| FISH | Direct | Détection des infections |
| PCR | Direct | Détection des infections |
| ddPCR | Direct | Detección de infección |
La nouvelle génération
Les laboratoires travaillent constamment à la mise à jour et à l’amélioration des systèmes de test afin de pouvoir offrir des tests aussi fiables que possible. Les tests qui sont disponibles avec un niveau de précision plus élevé et une indication de test plus fidèle à la nature sont développés et proposés par les laboratoires leaders en matière de lyme et de coinfection :
| Test | Laboratoire | Web |
| ImmunoBlot | IGeneX | https://igenex.com/ |
| FISH | IGeneX | https://igenex.com/ |
| ddPCR | Galaxy | https://www.galaxydx.com/ |
| EliSpot, iSpot, ImmunoBlot, Tickplex, Elisa | Laboratoires Armin | https://arminlabs.com/en/ |
